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液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,柱內(nèi)徑為1~4mm,柱長(zhǎng)為10~50cm,柱形多為直形,內(nèi)部充滿微粒固定相。近年來,由于高性能填充劑的細(xì)?;?,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內(nèi)徑為...
制備型液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,可分為以下類型:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜1、快速色譜柱壓通常為2bar(或30psi)左右,對(duì)于那些容易分離的簡(jiǎn)單混合物,由于快速色譜具有操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),常常是實(shí)驗(yàn)室的選擇。但快速色譜不同于一般的層析分離,這種分離沒有壓力,而快速分離通常使用瓶裝氮?dú)饧訅?,使流?dòng)相具有一定的流速,從而縮短了分離時(shí)間。快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,柱直徑為3~10cm.長(zhǎng)...
高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)...
制備色譜是一般由泵提供壓力,壓力在5~20bar。中低壓色譜柱與常壓柱、HPLC柱有比較大的不同:在使用是是封閉的,但是可以比較方便的打開與調(diào)節(jié)長(zhǎng)度,這與中低壓色譜常常固體上樣相適應(yīng)的。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱、玻璃柱、不銹鋼柱三種。制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應(yīng)對(duì)不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時(shí)盡可能減少成本。低壓:一般而言,低壓適合易分離化合物,但分離時(shí)間長(zhǎng)很容易造成敏感化合物分解。Flash:Flash是應(yīng)對(duì)低壓分離時(shí)間長(zhǎng)而出現(xiàn)的替...
高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。1.進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。2.輸液系統(tǒng)該系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47~4.4X107Pa流速可調(diào)且穩(wěn)定,當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí),可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),可加快其在柱中的移動(dòng)速度,這對(duì)提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存錯(cuò)和梯度儀,可使流動(dòng)相隨...
液相色譜技術(shù)自發(fā)明以來,由于其高效、高靈敏度等特點(diǎn),得到了飛速發(fā)展。近年來,伴隨著生物技術(shù)和精細(xì)化工的發(fā)展,作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視,成為了生物技術(shù)產(chǎn)品和研究中*的手段。制備液相色譜按照一次進(jìn)樣量的多少,可以分為3種規(guī)模,即半制備色譜、制備色譜和工業(yè)級(jí)色譜。制備色譜以生產(chǎn)純物質(zhì)為目的,在經(jīng)濟(jì)合理的前提下,規(guī)模越大越好。分析色譜與制備色譜的根本區(qū)別在于分離目的不同。分析色譜,反映的是樣品的組成,追求的是高效分離和高靈敏度,不需要收集特定的餾分,洗脫液通常作為...
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