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中壓制備色譜的操作方法介紹

更新時(shí)間:2023-04-07      點(diǎn)擊次數(shù):1284
  中壓制備色譜是一種廣泛應(yīng)用于藥物、化學(xué)、食品等領(lǐng)域的分離純化技術(shù)。其作用是對(duì)復(fù)雜混合物進(jìn)行分離純化,從中得到目標(biāo)化合物。
  中壓制備色譜可用于分離純化天然產(chǎn)物、合成物或混合物。其作用是將復(fù)雜的混合物分離成單一化合物或純化化合物。與其他分離方法相比,中壓制備色譜具有分離效率高、選擇性好、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),因此被廣泛應(yīng)用于藥物、化學(xué)、食品等領(lǐng)域。
  分離原理是根據(jù)化合物在不同穩(wěn)定相(固體或液體)中的分配行為,通過它們與固定在柱上的特定填料的相互作用來實(shí)現(xiàn)。填料具有不同的親和性,可以選擇性地吸附或排除不同化合物,以實(shí)現(xiàn)分離和純化目的。常用的填料有硅膠、OCTADECYL硅膠、石墨碳和氮化硅(C18)等。
  中壓制備色譜的操作方法:
  1.前處理
  樣品準(zhǔn)備:為了得到準(zhǔn)確的色譜分析結(jié)果,樣品必須具有高度純度。混合物可以通過提取、分離和純化等方法進(jìn)行前處理。
  溶劑選擇:在進(jìn)行色譜分析之前,必須選擇合適的流動(dòng)相。通常用于中壓制備色譜中的流動(dòng)相是有機(jī)溶劑(如甲醇、乙醇、醚等)和水的混合物。
  2.柱選擇與填料選擇
  柱選擇:柱是中壓制備色譜的核心部分。對(duì)于中壓制備色譜,通常選擇內(nèi)徑較大的柱(10-50mm)。
  填料選擇:常用的填料有硅膠、OCTADECYL硅膠、石墨碳和C18等。選擇填料應(yīng)根據(jù)化合物的極性和化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行。
  3.裝柱和校準(zhǔn)
  裝柱:將選好的填料放入柱中,使之均勻分布。
  校準(zhǔn):根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的流動(dòng)相和溫度等條件,確定最佳分離條件。
  4.色譜分離實(shí)驗(yàn)
  將樣品溶液加入柱中,通過未固定的化學(xué)互作用,使其分離成單一或純凈化合物。同時(shí),記錄樣品進(jìn)入柱和流經(jīng)柱的時(shí)間,并根據(jù)判斷溶液進(jìn)出時(shí)間的間隔來評(píng)估分離效果。
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