提高液相色譜中柱效的有效途徑有：減小填料粒徑，增加色譜柱長，使用盡量大小均一、外型規(guī)則的填料，使用合適的流速，使用合適的流動(dòng)相組成，使用合適的固定相。

　　高效液相色譜的工作方式：

　　在柱層析中，溶劑在重力作用下滴入裝有吸附劑的色譜柱中。高效液相色譜是一種改進(jìn)的柱色譜。在高達(dá)400個(gè)大氣壓的高壓下，泵輸送溶劑通過色譜柱。柱吸附劑或固定相通常是由固體顆粒（如二氧化硅或聚合物）制成的顆粒材料。

　　與柱色譜相比，利用泵輸送，不僅可以快速分析，而且可以使用更小的顆粒作為柱填料。粒子越小，其表面積更大，通過固定相與流動(dòng)相及樣品組分之間的相互作用，可以更好地實(shí)現(xiàn)混合物中各組分分離。流動(dòng)相通常是溶劑（如水、乙腈、甲醇）的混合物。

　　混合物的組分由于與吸收劑顆粒的相互作用的程度不同而彼此分離，在此過程中不同組分的洗脫速率不同，從而導(dǎo)致組分流出色譜柱時(shí)分離。與柱色譜相比，高效液相色譜自動(dòng)化程度高，靈敏度高。

　　液相色譜柱柱體積計(jì)算同圓柱體體積計(jì)算：

　　具體計(jì)算過程如下：

　　1、可將液相色譜柱近似看成一個(gè)圓柱體，圓柱體體積計(jì)算公式為V=π*r*r*h，其中r為液相色譜柱的半徑，h為液相色譜柱的長度（即圓柱體的高）。

　　2、液相色譜柱型號為4.6x250mm：則代表內(nèi)徑（直徑）=4.6mm，則半徑=2.3mm，長度=250mm，所以其柱體積為V=3.14*2.3*2.3*250=4152.6立方毫米，換算成ml為4.15265ml，即液相色譜柱4.6x250mm的一個(gè)柱體積為4.15265ml（在基本不考慮柱死體積的情況下）。

　　3、液相色譜柱4.6x250mm的30個(gè)柱體積為4.15265ml*30，為124.5795ml，約124.6ml（在基本不考慮柱死體積的情況下）。